帽子结构是真核生物中mRNA经转录后修饰在5'端形成的一个特殊结构。牛痘病毒加帽酶是催化形成帽子结构的有效酶。因此对使用了牛痘病毒加帽酶的生物制品，需要对其残留量进行检测。

本试剂盒采用双抗夹心酶联免疫检测（ELISA）法，将牛痘病毒加帽酶标准品和待测样本加入预包被抗牛痘病毒加帽酶抗体的酶标板，然后加入稀释后的生物素标记的牛痘病毒加帽酶检测抗体，最后加入Streptavidin-HRP，形成抗体+抗原+抗体-Biotin+ SA-HRP复合物，洗板后加入TMB显色液显色。TMB在HRP酶的催化下由无色转化成蓝色并在终止液的作用下最终转化成黄色。黄色的深浅与样本中被检测到的牛痘病毒加帽酶的量呈正相关。