ウイルスがベクターの細胞治療用製品において、液滴度は、製品の含有量およびウイルスの量を示す指標である。総粒子数および遺伝子組数は、ウイルスの物理的な数(物理量)を表し、感染性数および遺伝子組数は、生物活性のあるウイルスの数(生物量)を表す。
物理的粒度(総粒子数):物理的なウイルス粒子の総数を指します。
生物濃度(転移濃度): 転移濃度は、細胞を効果的に転換してトランス遺伝子産物を発現することができるウイルスの量を指し、より遺伝子治療産物の有効成分の機能含有量を反映するものである。
检测の特徴
总颗粒数:
● GMP、FDA 21CFR Part 11 要求の適合
● 商品化检测试剂盒、結果稳定、质量可控
● HIV-I 型スローウイルスに基づく p24 タンパク質の一般的な検査方法
转导滴度检测:
● GMP、FDA 21CFR Part 11 要求の適合
● 293T、Jurkat等の細胞を共培養した後、分析を実施
● 遺伝子層面とタンパク質層面の多角分析によるウイルスの有効濃度
ウイルス滴度检测分类
物理滴度(p24)
● 样本来のソース:HIV-1 型に基づいて骨組みを改造した低速ウイルス製品
● 检验方法:Elisa 法、试剂盒质控符合监管机构要求
●定量量:6.25~200pg/ml
● 质控要求:
◆ 标曲:R2>0.99
◆ 加标回收率:80~120%
● BSL-2 環境下全封闭操作、生物安全性の保護
转导滴度
● 段階希釈遅いウイルス製剤と検出細胞(293T/Jurakt 細胞)を一定時間(通常 72 ~ 96 時間)共培養した後
◆ qPCR 法:細胞遺伝子組抽出後、CAR コピー数検査を実施
◆ FACS 法:様々な濃度の低速ウイルス感染液の CAR 性率を分析
● 両方の変換の結果、遺伝子層面とタンパク質層面のウイルスの有効濃度の分析に使用可能
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